HG_T 3618-1999
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ID： |
57FAC40D27A441F191DAC8D9737C57E9 |
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文件大小(MB)： |
0.17 |
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页数： |
6 |
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文件格式： |
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日期： |
2005-8-25 |
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HG 3615-1999,前言,本标 准 是 根据我国以往制定的苏云金杆菌企业标准等有关材料，结合我国实际情况而制定的,本标 准 对 苏云金杆菌悬浮剂的要求、试验方法、抽样以及包装、运输等作了具体要求和规定，从而为,苏云金杆菌的生产提供了统一的技术依据,本 标 准 由中华人民共和国原化学工业部技术监督司提出,本 标 准 由化学工业部沈阳化工研究院归口,本 标 准 主要起草单位:中国农业大学应用化学系,本 标 准参 加起草单位:湖北省生物农药工程研究开发中心、济南科贝尔生物工程有限公司,本 标 准 主要起草人:刘丰茂、王开梅、钱传范、钟连胜、赵欣听、王绮文,1172,中华人民共和国化工行业标准,HG 3618一1999,苏云金杆菌悬浮剂,Bacillusthuringiensissuspensioncon亡entrate,苏云 金 杆 菌(Bacillsuhtruingleniss，B.t.)是目前应用最广泛的一种微生物杀虫剂，它的主要杀虫,成分是伴抱晶体中的毒素蛋白，其中，对鳞翅目有毒力的蛋白相对分子质量为13000,范圈,本标准规定了苏云金杆菌悬浮剂的要求、试验方法以及标志、标签、包装、贮运,本标准适用于由苏云金杆菌原药和助剂制成的苏云金杆菌悬浮剂，主要用于防治鳞翅目害虫,2 引用标准,下 列 标准 所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所有版本均,为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性,GB /T 1 25o一1989 极限数值的表示方法和判定方法,GB /T 1 601一1993 农药pH值的测定方法,GB /T 1 604一1995 商品农药验收规则,GB /T 1 605一1979(1989) 商品农药采样方法,GB 3 79 6一1983 农药包装通则,GB /T 1 4825一1993 农药可湿性粉剂悬浮率测定方法,GB /T 1 615。一1995 农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法,HG 3 61 7一1999 苏云金杆菌原粉,3 要求,3.1 外观:棕黄色至褐色悬浮液体,3.2 苏云金杆菌悬浮剂还应符合表,表 1,1要求,苏云金杆菌悬浮剂控制项目指标,项目,指标,s000IU/“L 4000IU/尸L 2000lU/朴L,毒家蛋白，% ) 0.8 0。4 0.2,毒力效价([PxltJ小L〕[Halu加L」) ) 8000 4000 2000,pH值范围,0.,4.5~ 6.5,细度(150料m).% ) 98,悬浮率(有效成分)，% ) 80,注:Px和Ha分别为小菜蛾(Plutellaxylostella)和相铃虫(Heliothisa恤娜ra)的缩写,国家石油和化学工业局199一06一16批准2000一06一01实施,1173,HG 3618一1999,4 试验方法,除 另 有 说明，本方法所用试剂均为分析纯，所述溶液均为水溶液,4.1 抽样,按照 GB /T 1605-19790989)中第四章“乳剂和液体状态的采样”进行，用随机数表法确定抽样的,包装件数，最终抽样量应不少于250 mL,4.2 鉴别试验,当 用 生 物测定法检测产品质量产生疑问时，可用以下方法进行鉴定,用十 二 烷 基硫酸钠一聚丙烯酞胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法测定有效毒素蛋白的相对分子质量是,否为130 000，并同时测定毒素蛋白含量是否符合3.2指标的规定,4.3 毒素蛋白含量的测定,毒素 蛋 白 含量可以用SDS-PAGE一扫描法和SDS-PAGE一洗脱比色法两种方法进行测定，二者精密,度、准确度接近，前者由于自动化程度更高，而定为仲裁法,4.3.1 SDS-PAGE一扫描法(仲裁法),4.3.1.1 方法提要,用碱 性 溶 液处理苏云金杆菌悬浮剂伴抱晶体，使其降解为毒素蛋白，然后通过SDS-PAGE，依蛋白,质相对分子质量的差异，使毒素蛋白与其他杂蛋白分离，之后用薄层扫描仪或电泳图像扫描仪扫描蛋白,区带面积，进行定量,4.3.1.2 仪器、设备,电 泳 仪 ,夹芯 式 垂 直电泳槽(1.5 m m凹形带槽橡胶模框)、凝胶板面积145m mX100m m(1.5m m,12孔样,品槽模具),高 速 薄层 层析扫描仪或电泳图像扫描仪,离心 机 : 100 00r /min,分析 天 平 :精确至0.00 01 g ,4.3.1.3 试剂和溶液,过 硫 酸 铁(AP),十 二 烷 基硫酸钠(SDS),四 甲基 乙 二 胺(TEMED),氢 氧 化 钠 ,30 %丙 烯 酞胺:称取丙烯酞胺30g ，亚甲基双丙烯酸胺(原称:甲叉双丙烯酞胺0.8 g ，溶于100m L,蒸馏水中，过滤，于4 0C暗处贮存备用,1m ol /L ,pH8.8三经基甲基氛基甲烷-HCI缓冲液:称取三经基甲基氨基甲烷30.25 g 溶于蒸馏水,中.用浓盐酸调至pH8.8 ，用燕馏水定容至250m L,1m ol /L ,pH6.8 三9基甲基氛基甲烷-HCI缓冲液:称取三9基甲基氨基甲烷12.10 g 溶于蒸馏水,中，用浓盐酸调至pH6.8 ，用蒸馏水定容至100m L,电极 缓 冲 液:称取三经基甲墓氛基甲烷3.03g，甘氨酸14.42 g ，十二烷基硫酸钠1g，用蒸馏水溶解,并定容至1 000 mL,3X 样 品 稀释液:1m ol/L,pH6.8三经基甲基氨基甲烷-HCI1 8.75m L，十二烷基硫酸钠6g，甘油,30 mL,琉基乙醇15 mL，少许滨酚蓝，用燕馏水定容至100 mL,染色 液 : 称取考马斯亮蓝(CBB)……
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